为什么 OD600 是微生物实验中最重要的参数之一？

1. OD600 的物理本质是什么？

OD600（Optical Density 600 nm）测量的并不是吸光本身，而是微生物细胞在 600 nm 波长下对光的散射效应。
原因：细菌在可见光区域几乎不吸光，主要产生米氏散射，因此 OD600 实际反映的是“浊度"。

2. 为什么选择 600 nm？

600 nm 波长具有以下优势：

• 微生物细胞对该波长几乎无吸收

• 散射信号稳定、线性范围宽

• 避免色素、培养基颜色带来的干扰

因此，600 nm 是微生物实验中几乎统一的国际标准。

3. OD600 与细胞浓度的关系

OD600 通常用来估算细胞密度（CFU/mL），其关系可用线性拟合或经验公式表示：

$$\text{CFU/mL}=k\times \text{OD600}$$CFU/mL=k×OD600

不同菌种、培养基、仪器均会影响系数 k，因此需要每个实验室自行建立标准曲线。

4. OD600 测量的常见误差来源

5. 如何获得稳定可靠的 OD600？

• 使用统一光路的专业 OD600 仪（如固定 600 nm 波长、固定光程）

• 测量前充分 vortex 混匀

• 比色皿保持清洁透明

• 使用同型号试管或比色皿

• 测量高浓度时进行 1:10 或 1:20 稀释

若使用如 Implen OD600® 这类固定光路设备，可显著降低试管差异导致的误差。

6. 总结

OD600 虽然简单，却是微生物实验最重要的基础数据。正确理解其原理、限制以及误差来源，有助于提升实验的可靠性，也能为后续的蛋白表达、发酵监控、代谢研究提供更准确的数据支撑。